fruitПлодоводствоFruit Growing0134-9759Институт плодоводства10.47612/0134-9759-2023-35-62-68fruit-675Research ArticleПЛОДОВОДСТВО И ЯГОДОВОДСТВО В БЕЛАРУСИFRUIT AND SMALL FRUIT GROWING IN ВELARUSЭффективность ИФА и ПЦР-анализа при диагностике Raspberry bushy dwarf virus (RBDV) у растений малины в культуре in vitroEffectiveness of ELISA and PCR-tests in diagnosis Raspberry bushy dwarf virus (RBDV) in raspberry plants in in vitro cultureГашенкоО. А.GashenkoO. A.

ул. Ковалёва, 2, аг. Самохваловичи, Минский район, 223013, Беларусь 

belhort@belsad.byБожидайТ. Н.BozhidaiT. N.

ул. Ковалёва, 2, аг. Самохваловичи, Минский район, 223013, Беларусь 

belhort@belsad.byКолбановаЕ. В.KolbanovaE. V.

ул. Ковалёва, 2, аг. Самохваловичи, Минский район, 223013, Беларусь 

belhort@belsad.byКухарчикН. В.KukharchikN. V.

ул. Ковалёва, 2, аг. Самохваловичи, Минский район, 223013, Беларусь 

belhort@belsad.byРУП «Институт плодоводства»Belarus2023251120233526268Copyright © Гашенко О.А., Божидай Т.Н., Колбанова Е.В., Кухарчик Н.В., 20232023Гашенко О.А., Божидай Т.Н., Колбанова Е.В., Кухарчик Н.В.Gashenko O.A., Bozhidai T.N., Kolbanova E.V., Kukharchik N.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://fruit.belal.by/jour/article/view/675

Исследования проводили в отделе биотехнологии РУП «Институт плодоводства» в 2022–2023 гг. на сортах малины летней (Метеор, Laszka) и ремонтантной (Похвалинка, Малиновая гряда, Карамелька, Брянское диво), зараженных Raspberry bushy dwarf virus. Экспланты для введения в культуру in vitro малины необходимо брать с кустов, предварительно протестированных методом ИФА или ПЦР на отсутствие RBDV, так как культура in vitro не освобождает растения от данного патогена. Для снижения объемов тестов ИФА и ПЦР-анализа необходимо регистрировать введенные меристемы и растения-регенеранты, полученные из каждой меристемы как в культуре in vitro, так и ex vitro. Наличие/отсутствие RBDV у растений-регенерантов в культуре in vitro можно определять как с помощью ИФА, так и ПЦР.Исследования проведены в рамках договора с БРФФИ № Б22МЛДГ-007 от 1 апреля 2022 г., задания «Разработка биотехнологических способов (in vitro и ex vitro) оздоровления от вируса кустистой карликовости малины (Raspberry bushy dwarf virus) с целью увеличения продуктивности промышленных насаждений малины» (2022–2023 гг.).

The studies were carried out in the Biotechnology Department of the RUE “Institute of Fruit Growing” in 2022–2023 on summer-bearing raspberry varieties (Meteor, Laszka) and remontant raspberry (Pokhvalinka, Malinovaya griada, Karamelka, Bryanskoje divo) infected with Raspberry bushy dwarf virus (RBDV). Explants for introduction into in vitro culture of raspberry must be taken from the bushes previously tested by ELISA or PCR for the absence of RBDV, since in vitro culture does not make plants free from this pathogen. To reduce the volume of ELISA and PCR tests, it is necessary to register the introduced meristems and regenerated plants obtained from each meristem both in culture in vitro and ex vitro.The presence or absence of RBDV in regenerative plants in in vitro culture can be determined using both ELISA and PCR. The studies were carried out as part of the agreement with the Belarusian Republican Foundation for Fundamental Research No.B22MLDG-007 dated April 1, 2022, task “Development of biotechnological methods (in vitro and ex vitro) for recovery from the Raspberry bushy dwarf virus in order to increase the productivity of commercial raspberry plantations” (2022–2023).

малинакультура in vitroвирус кустистой карликовости малины (RBDV)DAS-ELISA-тестПЦРБеларусьraspberryin vitro cultureraspberry bushy dwarf virus (RBDV)DAS-ELISA testPCRBelarusReferencesТихонова, К. О. Распространенность, вредоносность вирусных болезней и эффективные методы оздоровления малины: автореф. дис. … канд. с.-х. наук: 06.01.07 / К. О. Тихонова ; Всерос. селекц.-технол. ин-т садоводства и питомниководства. – М., 2016. – 24 с.Тихонова, К. О. Распространенность, вредоносность вирусных болезней и эффективные методы оздоровления малины: автореф. дис. … канд. с.-х. наук: 06.01.07 / К. О. Тихонова ; Всерос. селекц.-технол. ин-т садоводства и питомниководства. – М., 2016. – 24 с.Оздоровление малины от вируса кустистой карликовости (RBDV) методом комплексной терапии в культуре in vitro / О. Ю. Антонова [и др.] // Достижения науки и техники АПК. – 2015. – Т. 29, № 7. – С. 61–64.Оздоровление малины от вируса кустистой карликовости (RBDV) методом комплексной терапии в культуре in vitro / О. Ю. Антонова [и др.] // Достижения науки и техники АПК. – 2015. – Т. 29, № 7. – С. 61–64.Распространенность, вредоносность вирусных болезней малины и современные методы оздоровления / М. Т. Упадышев [и др.] // Современные тенденции устойчивого развития ягодоводства России (земляника, малина): сб. науч. тр., посвящ. 90-летию со дня рождения канд. с.-х. наук К. Т. Ярковой / М-во науки и высш. образования Рос. Федерации, Федер. науч. центр им. И. В. Мичурина; редкол.: М. Ю. Акимов (гл. ред.) [и др.]. – Мичуринск-наукоград РФ, 2019. – С. 292–307.Распространенность, вредоносность вирусных болезней малины и современные методы оздоровления / М. Т. Упадышев [и др.] // Современные тенденции устойчивого развития ягодоводства России (земляника, малина): сб. науч. тр., посвящ. 90-летию со дня рождения канд. с.-х. наук К. Т. Ярковой / М-во науки и высш. образования Рос. Федерации, Федер. науч. центр им. И. В. Мичурина; редкол.: М. Ю. Акимов (гл. ред.) [и др.]. – Мичуринск-наукоград РФ, 2019. – С. 292–307.Valasevich, N. Molecular characterization of Raspberry bushy dwarf virus isolates from Sweden and Belarus / N. Valasevich, N. Kukharchyk, A. Kvarnheden // Arch. of Virology. – 2011. – Vol. 156. – P. 369–374.Valasevich, N. Molecular characterization of Raspberry bushy dwarf virus isolates from Sweden and Belarus / N. Valasevich, N. Kukharchyk, A. Kvarnheden // Arch. of Virology. – 2011. – Vol. 156. – P. 369–374.Combined thermotherapy and cryotherapy for efficient virus eradication: relation of virus distribution, subcellular changes, cell survival and viral RNA degradation in shoot tips / Q. Wang [et al.] // Molecular Plant Pathology. – 2008. – Vol. 9, № 2. – P. 237–250.Combined thermotherapy and cryotherapy for efficient virus eradication: relation of virus distribution, subcellular changes, cell survival and viral RNA degradation in shoot tips / Q. Wang [et al.] // Molecular Plant Pathology. – 2008. – Vol. 9, № 2. – P. 237–250.Молекулярная характеристика патогенных вирусов плодовых и ягодных культур / Н. Н. Волосевич [и др.] // Генетические основы селекции растений : в 4 т. Т. 4 : Биотехнология в селекции растений. Геномика и генетическая инженерия / Ин-т генетики и цитологии ; науч. ред. А. В. Кильчевский, Л. В. Хотылева. – Минск, 2014. – Гл. 16. – С. 441–450.Молекулярная характеристика патогенных вирусов плодовых и ягодных культур / Н. Н. Волосевич [и др.] // Генетические основы селекции растений : в 4 т. Т. 4 : Биотехнология в селекции растений. Геномика и генетическая инженерия / Ин-т генетики и цитологии ; науч. ред. А. В. Кильчевский, Л. В. Хотылева. – Минск, 2014. – Гл. 16. – С. 441–450.Волосевич, Н. Н. Диагностика вируса кустистой карликовости малины (RBDV) методом RT-PCR / Н. Н. Волосевич, Н. В. Кухарчик // Земляробства і ахова раслін. – 2010. – № 6. – С. 4–6.Волосевич, Н. Н. Диагностика вируса кустистой карликовости малины (RBDV) методом RT-PCR / Н. Н. Волосевич, Н. В. Кухарчик // Земляробства і ахова раслін. – 2010. – № 6. – С. 4–6.Колбанова, Е. В. Возможность определения вируса кустистой карликовости малины (RBDV) у растений-регенерантов малины в культуре in vitro методом DAS-ELISA теста / Е. В. Колбанова, Т. Н. Божидай // Плодоводство : сб. науч. тр. / РУП «Ин-т плодоводства» ; редкол.: В. А. Самусь (гл. ред.) [и др.]. – Минск, 2018. – Т. 30. – С. 131–135.Колбанова, Е. В. Возможность определения вируса кустистой карликовости малины (RBDV) у растений-регенерантов малины в культуре in vitro методом DAS-ELISA теста / Е. В. Колбанова, Т. Н. Божидай // Плодоводство : сб. науч. тр. / РУП «Ин-т плодоводства» ; редкол.: В. А. Самусь (гл. ред.) [и др.]. – Минск, 2018. – Т. 30. – С. 131–135.Кухарчик, Н. В. Вирусные и фитоплазменные болезни плодовых и ягодных культур в Беларуси / Н. В. Кухарчик. – Минск: Беларус. навука, 2012. – 209 с.Кухарчик, Н. В. Вирусные и фитоплазменные болезни плодовых и ягодных культур в Беларуси / Н. В. Кухарчик. – Минск: Беларус. навука, 2012. – 209 с.Ухатова, Ю. В. Совершенствование методов криоконсервации и оздоровление от вирусных болезней образцов вегетативно размножаемых культур : дис. … канд. биол. наук : 06.01.05 / Ю. В. Ухатова. – СПб., 2017. – 137 л.Ухатова, Ю. В. Совершенствование методов криоконсервации и оздоровление от вирусных болезней образцов вегетативно размножаемых культур : дис. … канд. биол. наук : 06.01.05 / Ю. В. Ухатова. – СПб., 2017. – 137 л.Вирусные болезни на сортах малины Rubus idaeus L. и современные методы оздоровления / М. Т. Упадышев [и др.] // Аграр. наука. – 2019. – № 3. – С. 143–146.Вирусные болезни на сортах малины Rubus idaeus L. и современные методы оздоровления / М. Т. Упадышев [и др.] // Аграр. наука. – 2019. – № 3. – С. 143–146.Certification scheme for Rubus. EPPO Standards PM 4/10 (2) // Bulletin OEPP/EPPO. – 2009. – Vol. 39. – P. 271–277.Certification scheme for Rubus. EPPO Standards PM 4/10 (2) // Bulletin OEPP/EPPO. – 2009. – Vol. 39. – P. 271–277.Методика диагностики основных вирусных инфекций плодовых и ягодных культур / Н. В. Кухарчик [и др.]. – Минск: А. Н. Вараксин, 2015. – 32 с.Методика диагностики основных вирусных инфекций плодовых и ягодных культур / Н. В. Кухарчик [и др.]. – Минск: А. Н. Вараксин, 2015. – 32 с.Рягузова, Т. В. Диагностика вирусов плодово-ягодных культур и современные методы их оздоровления / Т. В. Рягузова // Селекция и сорторазведение садовых культур. – 2020. – Т. 7, № 1–2. – С. 130–134.Рягузова, Т. В. Диагностика вирусов плодово-ягодных культур и современные методы их оздоровления / Т. В. Рягузова // Селекция и сорторазведение садовых культур. – 2020. – Т. 7, № 1–2. – С. 130–134.Технология получения оздоровленного от вирусов посадочного материала плодовых и ягодных культур: метод. указания / М-во сел. хоз-ва Рос. Федерации, Рос. науч.-исслед. ин-т информации и техн.-экон. исслед. по инж.-техн. обеспечению агропром. комплекса; сост.: М. Т. Упадышев [и др.]. – М.: Росинформагротех, 2013. – 92 с.Технология получения оздоровленного от вирусов посадочного материала плодовых и ягодных культур: метод. указания / М-во сел. хоз-ва Рос. Федерации, Рос. науч.-исслед. ин-т информации и техн.-экон. исслед. по инж.-техн. обеспечению агропром. комплекса; сост.: М. Т. Упадышев [и др.]. – М.: Росинформагротех, 2013. – 92 с.Гашенко, О. А. Оценка распространенности патогенных вирусов малины и оздоровления от RBDV на этапе инициации культуры in vitro / О. А. Гашенко, Н. В. Кухарчик // Global sci. a. innovations 2022: Centr. Asia. – 2022. – № 4 (18), т. II. – С. 52–56.Гашенко, О. А. Оценка распространенности патогенных вирусов малины и оздоровления от RBDV на этапе инициации культуры in vitro / О. А. Гашенко, Н. В. Кухарчик // Global sci. a. innovations 2022: Centr. Asia. – 2022. – № 4 (18), т. II. – С. 52–56.Чердакли, А. А. Выделение РНК из растительных тканей малины и смородины черной для идентификации вирусов RBDV и BRV [Электронный ресурс] / А. А. Чердакли, С. Радзениеце // Федер. науч. селекц.-технол. Центр садоводства и питомниководства. – 2020. – Режим доступа: https://vstisp.org/vstisp/index.php/internet-konferentsiya/41-small-fruits/1350-doklady-konferentsii-reshenie-problem-v-pitomnikovodstve-i-sadovodstve. – Дата доступа: 14.11.2022.Чердакли, А. А. Выделение РНК из растительных тканей малины и смородины черной для идентификации вирусов RBDV и BRV [Электронный ресурс] / А. А. Чердакли, С. Радзениеце // Федер. науч. селекц.-технол. Центр садоводства и питомниководства. – 2020. – Режим доступа: https://vstisp.org/vstisp/index.php/internet-konferentsiya/41-small-fruits/1350-doklady-konferentsii-reshenie-problem-v-pitomnikovodstve-i-sadovodstve. – Дата доступа: 14.11.2022.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.