Эффективность ИФА и ПЦР-анализа при диагностике Raspberry bushy dwarf virus (RBDV) у растений малины в культуре in vitro
https://doi.org/10.47612/0134-9759-2023-35-62-68
Аннотация
Исследования проводили в отделе биотехнологии РУП «Институт плодоводства» в 2022–2023 гг. на сортах малины летней (Метеор, Laszka) и ремонтантной (Похвалинка, Малиновая гряда, Карамелька, Брянское диво), зараженных Raspberry bushy dwarf virus. Экспланты для введения в культуру in vitro малины необходимо брать с кустов, предварительно протестированных методом ИФА или ПЦР на отсутствие RBDV, так как культура in vitro не освобождает растения от данного патогена. Для снижения объемов тестов ИФА и ПЦР-анализа необходимо регистрировать введенные меристемы и растения-регенеранты, полученные из каждой меристемы как в культуре in vitro, так и ex vitro. Наличие/отсутствие RBDV у растений-регенерантов в культуре in vitro можно определять как с помощью ИФА, так и ПЦР.
Исследования проведены в рамках договора с БРФФИ № Б22МЛДГ-007 от 1 апреля 2022 г., задания «Разработка биотехнологических способов (in vitro и ex vitro) оздоровления от вируса кустистой карликовости малины (Raspberry bushy dwarf virus) с целью увеличения продуктивности промышленных насаждений малины» (2022–2023 гг.).
Ключевые слова
малина,
культура in vitro,
вирус кустистой карликовости малины (RBDV),
DAS-ELISA-тест,
ПЦР,
Беларусь
Об авторах
О. А. Гашенко
РУП «Институт плодоводства»
Беларусь
Беларусь
ул. Ковалёва, 2, аг. Самохваловичи, Минский район, 223013, Беларусь
Т. Н. Божидай
РУП «Институт плодоводства»
Беларусь
Беларусь
ул. Ковалёва, 2, аг. Самохваловичи, Минский район, 223013, Беларусь
Е. В. Колбанова
РУП «Институт плодоводства»
Беларусь
Беларусь
ул. Ковалёва, 2, аг. Самохваловичи, Минский район, 223013, Беларусь
Н. В. Кухарчик
РУП «Институт плодоводства»
Беларусь
Беларусь
ул. Ковалёва, 2, аг. Самохваловичи, Минский район, 223013, Беларусь
Список литературы
1. Тихонова, К. О. Распространенность, вредоносность вирусных болезней и эффективные методы оздоровления малины: автореф. дис. … канд. с.-х. наук: 06.01.07 / К. О. Тихонова ; Всерос. селекц.-технол. ин-т садоводства и питомниководства. – М., 2016. – 24 с.
2. Оздоровление малины от вируса кустистой карликовости (RBDV) методом комплексной терапии в культуре in vitro / О. Ю. Антонова [и др.] // Достижения науки и техники АПК. – 2015. – Т. 29, № 7. – С. 61–64.
3. Распространенность, вредоносность вирусных болезней малины и современные методы оздоровления / М. Т. Упадышев [и др.] // Современные тенденции устойчивого развития ягодоводства России (земляника, малина): сб. науч. тр., посвящ. 90-летию со дня рождения канд. с.-х. наук К. Т. Ярковой / М-во науки и высш. образования Рос. Федерации, Федер. науч. центр им. И. В. Мичурина; редкол.: М. Ю. Акимов (гл. ред.) [и др.]. – Мичуринск-наукоград РФ, 2019. – С. 292–307.
4. Valasevich, N. Molecular characterization of Raspberry bushy dwarf virus isolates from Sweden and Belarus / N. Valasevich, N. Kukharchyk, A. Kvarnheden // Arch. of Virology. – 2011. – Vol. 156. – P. 369–374.
5. Combined thermotherapy and cryotherapy for efficient virus eradication: relation of virus distribution, subcellular changes, cell survival and viral RNA degradation in shoot tips / Q. Wang [et al.] // Molecular Plant Pathology. – 2008. – Vol. 9, № 2. – P. 237–250.
6. Молекулярная характеристика патогенных вирусов плодовых и ягодных культур / Н. Н. Волосевич [и др.] // Генетические основы селекции растений : в 4 т. Т. 4 : Биотехнология в селекции растений. Геномика и генетическая инженерия / Ин-т генетики и цитологии ; науч. ред. А. В. Кильчевский, Л. В. Хотылева. – Минск, 2014. – Гл. 16. – С. 441–450.
7. Волосевич, Н. Н. Диагностика вируса кустистой карликовости малины (RBDV) методом RT-PCR / Н. Н. Волосевич, Н. В. Кухарчик // Земляробства і ахова раслін. – 2010. – № 6. – С. 4–6.
8. Колбанова, Е. В. Возможность определения вируса кустистой карликовости малины (RBDV) у растений-регенерантов малины в культуре in vitro методом DAS-ELISA теста / Е. В. Колбанова, Т. Н. Божидай // Плодоводство : сб. науч. тр. / РУП «Ин-т плодоводства» ; редкол.: В. А. Самусь (гл. ред.) [и др.]. – Минск, 2018. – Т. 30. – С. 131–135.
9. Кухарчик, Н. В. Вирусные и фитоплазменные болезни плодовых и ягодных культур в Беларуси / Н. В. Кухарчик. – Минск: Беларус. навука, 2012. – 209 с.
10. Ухатова, Ю. В. Совершенствование методов криоконсервации и оздоровление от вирусных болезней образцов вегетативно размножаемых культур : дис. … канд. биол. наук : 06.01.05 / Ю. В. Ухатова. – СПб., 2017. – 137 л.
11. Вирусные болезни на сортах малины Rubus idaeus L. и современные методы оздоровления / М. Т. Упадышев [и др.] // Аграр. наука. – 2019. – № 3. – С. 143–146.
12. Certification scheme for Rubus. EPPO Standards PM 4/10 (2) // Bulletin OEPP/EPPO. – 2009. – Vol. 39. – P. 271–277.
13. Методика диагностики основных вирусных инфекций плодовых и ягодных культур / Н. В. Кухарчик [и др.]. – Минск: А. Н. Вараксин, 2015. – 32 с.
14. Рягузова, Т. В. Диагностика вирусов плодово-ягодных культур и современные методы их оздоровления / Т. В. Рягузова // Селекция и сорторазведение садовых культур. – 2020. – Т. 7, № 1–2. – С. 130–134.
15. Технология получения оздоровленного от вирусов посадочного материала плодовых и ягодных культур: метод. указания / М-во сел. хоз-ва Рос. Федерации, Рос. науч.-исслед. ин-т информации и техн.-экон. исслед. по инж.-техн. обеспечению агропром. комплекса; сост.: М. Т. Упадышев [и др.]. – М.: Росинформагротех, 2013. – 92 с.
16. Гашенко, О. А. Оценка распространенности патогенных вирусов малины и оздоровления от RBDV на этапе инициации культуры in vitro / О. А. Гашенко, Н. В. Кухарчик // Global sci. a. innovations 2022: Centr. Asia. – 2022. – № 4 (18), т. II. – С. 52–56.
17. Чердакли, А. А. Выделение РНК из растительных тканей малины и смородины черной для идентификации вирусов RBDV и BRV [Электронный ресурс] / А. А. Чердакли, С. Радзениеце // Федер. науч. селекц.-технол. Центр садоводства и питомниководства. – 2020. – Режим доступа: https://vstisp.org/vstisp/index.php/internet-konferentsiya/41-small-fruits/1350-doklady-konferentsii-reshenie-problem-v-pitomnikovodstve-i-sadovodstve. – Дата доступа: 14.11.2022.
Рецензия
Для цитирования:
Гашенко О.А., Божидай Т.Н., Колбанова Е.В., Кухарчик Н.В. Эффективность ИФА и ПЦР-анализа при диагностике Raspberry bushy dwarf virus (RBDV) у растений малины в культуре in vitro. Плодоводство. 2023;35(2):62-68. https://doi.org/10.47612/0134-9759-2023-35-62-68
For citation:
Gashenko O.A., Bozhidai T.N., Kolbanova E.V., Kukharchik N.V. Effectiveness of ELISA and PCR-tests in diagnosis Raspberry bushy dwarf virus (RBDV) in raspberry plants in in vitro culture. Fruit Growing. 2023;35(2):62-68. (In Russ.) https://doi.org/10.47612/0134-9759-2023-35-62-68
Просмотров: 97
Послать статью по эл. почте 