Результативность диагностики белорусских изолятов вируса Шарки сливы лабораторными методами

Исследования проведены в отделе биотехнологии РУП «Институт плодоводства» в 2011–2012 гг. Предварительную визуальную диагностику вируса Шарки сливы проводили в насаждениях косточковых культур (слива, алыча, вишня, черешня) в период вегетации: в конце весны – начале лета. Оценена результативность диагностики белорусских изолятов вируса Шарки сливы с помощью ряда лабораторных методов, в том числе с использованием поликлональных, рекомбинантных и моноклональных универсальных антител для иммуноферментного анализа и метода IC-RT-PCR.

Показано, что поликлональные антитела более эффективны для массовой диагностики белорусских изолятов вируса Шарки, чем моноклональные универсальные антитела.

В то же время вариант ИФА с использованием поликлональных антител наименее чувствительный, максимальное разведение, при котором было возможно определить наличие данного вируса в тканях растения, не превышает 1:20. Использование моноклональных и рекомбинантных антител в ИФА-тесте позволило определить вирус в образцах, разведенных до 1:100, метод IC-RT-PCR – при разведении экстрактов до 1:50000.

1. OEPP/EPPO. Data sheets on quarantine organisms N 96: Plum pox virus // Bulletin OEPP/EPPO. – 1983. – Vol. 13. – P. 1.

2. OEPP/EPPO. Specific quarantine requirements. Plum pox potyvirus. Inspection and test procedures // Bulletin OEPP/EPPO. – 1990. – Vol. 94. – P. 267-278.

3. OEPP/EPPO. Quarantine Procedure N 43. Plum pox potyvirus – inspection and test methods // Bulletin OEPP/EPPO. – 1992. – Vol. 22. – P. 239-242.

4. EPPO/OEPP. SMT Project SMT-4-CT98-2252 (Протокол диагностики карантинного организма - PPV) // Bulletin OEPP/EPPO. – 2002. – N 34. – P. 155-157.

5. Quarantine Pests for Europe. Data sheets on Quarantine Pests for the European Communities and for the European and Mediterranean Plant Protection Oganization. Prepead by CABI and EPPO for EC [Electronic resource]. – 1992. – Mode of access: https://www.eppo.int/.../virus/Plum_pox_virus/PPV000_ds.pdf. – Date of access: 20.02.2014.

6. Quarantine Pests for Europe. Date sheets on Quarantine Peats for European Communities and for the European and Mediterranean Plant Protaction Organization. Prepead by CABI and EPPO for EC [Electronic resource]. – 1997. – Mode of access: www.eppo.int/.../virus/Plum_pox_virus/pm7-32(1)%20PPV000%20web.pdf. – Date of access: 12.02.2014.

7. Nemeth, M. History and importance of plum pox in stone-fruit production / M. Nemeth // EPPO Bull. – 1994. – N 24. – P. 525-526.

8. Dunez, J. Plum pox virus / J. Dunez, D. Sutic // European Handbook of plant disease. – Blackwell, London, 1988. – Р. 44-46.

9. Kerlan, C. Some properties of plum pox virus and its nucleic acid and protein components / C. Kerlan, J. Dunez // Acta Hort. – 1976. – N 67. – P. 185-192.

10. Salavei, A. Detection of plum pox virus in regions of Belarus / A. Salavei [et al.] // 22nd ―International Conference on Virus and Other Trandmissible Diseases of Fruit Crops‖, Rome, 5-8 Jun 2012 / ICVF; Scientific Committee: W. Jelkmann [et al.]. – Rome, 2012. – Р. 152.

11. Malinowski, T. Partial characterisation of biological properties of PPV-C isolates found in Belarus and establishment of in vitro cultures of infected L2 and OWP-6 rootstocks / T. Malinowski [et al.] // 22nd ―International Conference on Virus and Other Trandmissible Diseases of Fruit Crops‖, Rome, 5-8 Jun 2012 / ICVF; Scientific Committee: W. Jelkmann [et al.]. – Rome, 2012. – P. 149.

12. Salavei, A.V. Sanitary status of Sharka on Stone fruit trees in Belarus / A.V. Salavei, N.V. Kukharchyk, T. Malinovski // International symposium on Plum pox virus, Sofia, September 5-9, 2010, Bulgaria. – Sofia, 2010. – P. 39.